为方便起见，许多客户使用 GelRed® 或 GelGreen® 预制凝胶。然而，由于 GelRed® 和 GelGreen® 是高亲和力染料，设计为较大的染料以提高其安全性，因此它们会影响 DNA 在预制凝胶中的迁移。一些样品，例如限制性消化的 DNA，可能会在 GelRed® 或 GelGreen® 预制凝胶中异常迁移。

提示 #1：加载更少的 DNA

GelRed® 或 GelGreen® 预制凝胶中的污迹和微笑最常由 DNA 超载引起。如果您看到条带迁移发生变化或出现拖尾和微笑，请尝试减少加载的 DNA 量。已知浓度的 ladder 和样品的推荐上样量为 50-200 ng/泳道。对于未知浓度的样品，尝试加载通常量的一半或三分之一的 DNA。这通常可以解决带迁移问题。

提示 #2：尝试染色后方案

为避免染料可能对 DNA 迁移产生任何干扰，我们建议使用染色后方案。如果您的应用需要加载超过推荐量的 DNA，请使用染色后方案。虽然我们建议将凝胶染色后 30 分钟，但您可能会在短短五分钟内看到条带，具体取决于存在的 DNA 量。染色后溶液可以重复使用。有关详细方案，请参阅GelRed® 产品信息表或GelGreen® 产品信息表。

提高琼脂糖凝胶分辨率的其他技巧：

• 如果您在使用 GelRed® 或 GelGreen® 进行后染色后发现 DNA 迁移问题或拖尾，则问题不是由核酸染料引起的。避免过度填充凝胶孔，以防止 DNA 弄脏凝胶表面。

• 倒入较低百分比的琼脂糖凝胶。较高分子量的 DNA 使用较低百分比的凝胶分离效果更好。

• 更改运行缓冲区。TBE 缓冲液比 TAE 缓冲液具有更高的缓冲能力。

我们的大多数产品在室温下可稳定保存数日，因此产品很可能仍能正常工作。为了安全起见，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前，先进行小规模的阳性对照实验，以确认该产品仍然适用于您的应用。

我们知道的一个例外是 GelGreen™，它比我们大多数其他荧光染料对光照更敏感。如果 GelGreen™ 长时间（数天至数周）暴露在环境光下，其颜色将从深橙色变为砖红色。如果发生这种情况，GelGreen 将不再适用于凝胶染色。

生物科学试剂盒
产品信息表上列出了自收到生物科学试剂盒之日起保证的保质期。一些套件在套件盒标签上印有有效期，这是从产品从我们工厂发货之日算起的保证保质期。套件的功能通常比保证的保质期长得多。如果您希望使用存储中的旧试剂盒，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前进行小规模阳性对照实验以确认该试剂盒仍适用于您的应用。

抗体和其他偶联物
产品信息表上列出了抗体和偶联物自收货之日起的保证保质期。抗体和其他结合物的功能通常比保证的保质期长得多。如果您希望使用存储中的旧偶联物，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前进行小规模阳性对照实验以确认该产品仍适用于您的应用。

对于冻干抗体，我们建议用甘油和抗菌防腐剂（如叠氮化钠）重构抗体以获得最长的保质期（请注意，叠氮化钠与 HRP 偶联物不相容）。

化学品、染料和凝胶染色剂
Biotium 保证化学品、染料和凝胶染色剂在您收到产品之日起至少一年内保持稳定。然而，只要按照建议储存，这些产品中的大多数在多年内都非常稳定。存储条件可在产品信息表或产品安全和数据表、材料安全数据表以及产品标签上找到。荧光化合物应避光以便长期储存。

如果您希望使用已储存超过一年的 Biotium 化合物，我们建议您进行小规模阳性对照实验，以确认该化合物在处理大量样品或珍贵样品之前仍适用于您的应用样品。

基于生产日期的有效期 (DOM)
如果您的机构要求您记录基于试剂生产日期的有效期，请联系 techsupport@biotium.com 寻求帮助。

有特殊稳定性考虑的化工产品：

酯类

酯类化合物包括：
• 琥珀酰亚胺酯（SE，也称为 NHS 酯），例如我们的胺反应性染料
• 乙酰氧基甲基酯（AM 酯），例如我们的膜渗透性离子指示剂染料
• 二乙酸酯改性染料，例如 ViaFluor ™ 405、CFDA 和 CFDA-SE 细胞活力/细胞增殖染料

只要避光和防潮，酯类染料在固体形式下是稳定的。酯在水溶液中不稳定。应在无水 DMSO中制备浓缩储备液（参见 Biotium 目录号90082）。无水 DMSO 中的储备液可在 -20°C 下干燥保存一个月或更长时间。酯类应在使用前立即用水溶液稀释。琥珀酰亚胺酯 (SE) 应溶解在不含会与 SE 官能团反应的含胺化合物（如 Tris、甘氨酸或蛋白质）的溶液中。AM 酯和二乙酸化合物应溶解在不含血清的溶液中，因为血清可能含有会水解该化合物的酯酶。

关于 CF® 染料琥珀酰亚胺酯稳定性的说明

琥珀酰亚胺酯 (SE) 通常容易水解，从而导致标记效率降低。许多用于生命科学研究的市售荧光染料都是高度磺化的染料，这使得它们特别容易吸湿，从而加剧了水解问题。此外，对于几种市售的 SE 活性染料，SE 基团衍生自芳香族羧酸，而 Biotium 的所有 CF® 染料中的 SE 基团均由脂肪族羧酸制备。这种结构差异降低了 CF® Dye SE 反应基团对水解的敏感性，从而产生相对稳定的活性染料，与其他荧光染料的其他 SE 衍生物相比，标记效率始终更高。

马来酰亚胺、MTS 和硫代硫酸盐染料
与琥珀酰亚胺酯染料一样，这些染料也容易水解，尽管水解程度通常要低得多。因此，对于长期储存，建议使用无水 DMSO 制备储备液。

其他活性染料
胺类、氨氧基（也称为甲醛）、酰肼、叠氮化物、炔烃、BCN 和酪胺类活性染料，以及染料游离酸，在-20°C 下储存 6-12 年时通常在水溶液中稳定几个月或更长时间，只要不存在可能与染料的官能团发生反应的化合物。有关特定活性染料的更多信息，请参阅产品信息表。

腔肠素和 D-荧光素

按照建议储存时，腔肠素以固体形式稳定；它们在水溶液中不稳定。应在乙醇或甲醇中制备浓缩腔肠素储备液（通常为 1-100 mg/mL）；不要使用 DMSO 或 DMF 溶解腔肠素，因为这些溶剂会氧化化合物。腔肠素的乙醇或甲醇库存可在 -20°C 或以下储存六个月或更长时间；酒精储备在储存过程中可能会蒸发，因此请使用密封的螺旋盖小瓶并用封口膜包裹小瓶以进行长期储存。丙二醇也可用作溶剂以减少蒸发。如果溶剂蒸发，腔肠素仍会存在于小瓶中，因此在储存前记下小瓶中的体积，以便您可以根据需要调整溶剂体积以校正蒸发。使用前立即在水性缓冲液中制备工作溶液。腔肠素在水溶液中最多可稳定 5 小时。

Aquaphile™ 腔肠素是腔肠素的水溶性制剂。当按照建议储存时，它们以固体形式稳定。Aquaphile™ 腔肠素应在使用前立即溶解在水溶液中。它们在水溶液中最多可稳定 5 小时。

请注意，腔肠素主要是黄色固体，但可能含有深红色或棕色斑点。这不会影响产品稳定性或性能。如果您的腔肠素呈均匀的棕色，则说明它已被氧化，需要更换。

D-荧光素在固体形式下是稳定的，并且在按照建议储存时作为浓缩储备液；它在水溶液中的稀释工作浓度下不稳定。在水中制备浓缩的 D-荧光素储备溶液（通常为 1-100 mg/mL），并在 -20°C 或更低温度下分装储存六个月或更长时间。使用前立即准备工作解决方案。

有几种可能：

1. 染料可能已从溶液中沉淀出来。

• 将 GelRed® 或 GelGreen® 溶液加热至 45-50°C 两分钟并涡旋溶解。

• 在室温下储存染料以避免沉淀。

2. 如果您看到凝胶的高背景染色，则您使用的琼脂糖可能质量不佳。琼脂糖中的污染物可能与染料结合，导致背景增加。

GelRed® 和 GelGreen® 之间的主要区别在于它们的荧光激发和发射波长。GelRed® 具有红色荧光，类似于溴化乙锭。GelGreen® 具有绿色荧光，类似于 SYBR® Green 或 SYBR® Safe。两种染料都与标准的紫外透照仪兼容。GelGreen® 还与蓝光透照仪兼容，让用户避免将自己和他们的 DNA 样本暴露在紫外线辐射下。

GelRed® 和 GelGreen® 对双链核酸的灵敏度高于单链核酸，但 GelRed® 对单链核酸染色的灵敏度高于 GelGreen®。与单链核酸相比，GelRed® 对双链核酸的灵敏度大约是单链核酸的两倍，而对单链核酸染色的灵敏度是 GelGreen® 的大约五倍。

有关这些产品的更多信息，请访问我们的DNA 染色技术页面。

我们的大多数产品在室温下可稳定保存数天，但我们建议在 4°C 或 -20°C 下储存以延长保质期。对于我们的许多染料水溶液，这些化合物在室温下非常稳定，但我们建议冷藏以防止霉菌或其他微生物随着时间的推移而生长。因此，为节省运输成本，建议在 4°C 或 -20°C 下储存的产品可以在环境温度下或使用冰袋运输。这些产品可能会解冻而不影响产品性能。当您收到产品时，请将其置于推荐的存储条件下。

一些产品随附蓝色冰袋作为额外的高温预防措施。蓝色冰袋可在到达时解冻，而不会影响产品性能。

与 DMSO 中的原料相比，水配方是一种更新和改进的产品。我们建议在水中使用染料，以避免处理可通过皮肤吸收的 DMSO 的潜在危害。我们继续提供在 DMSO 中的染料，因为一些用户不希望改变他们既定的实验室协议。根据内部测试，两种配方的性能相似。