CELLDATA RNAstorm™ FFPE RNA Extraction Kit

与其他方法相比，从 FFPE（石蜡）组织切片中提取优质 RNA，产量提高 3 到 30 倍，DV200（RNA 长度超过 200 个核苷酸）提高 2 倍。

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常见问题

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福尔马林固定的组织样本是 RNA 提取的一个挑战，通常会导致可扩增 RNA 的产量低，并且在涉及酶促操作的后续步骤（包括逆转录和测序文库制备）中性能不佳。RNAstorm™ 提取试剂盒采用专有的 CAT5™ 技术，可增强去除甲醛引起的损伤，并提供更高产量和完整性的 RNA，如更高的 RIN 分数和更高的 DV200 (% RNA >200nt) 所示。对于在 RNA-seq、qPCR、微阵列或其他基因表达分析等应用中具有更高扩增性的 RNA，RNAstorm™ 试剂盒是您成功的最佳机会。

CAT5™ 技术用于酶促逆转甲醛交联
与基于加热的方法相比，可提取更高产量的可扩增 RNA
无需高温或刺激性溶剂即可温和处理样品
更高质量的 RNA，碎片更少
在 PCR、微阵列或下一代测序等下游分析中获得更好的结果
简单的基于离心柱的工作流程

注意：此套件的 CD201 试用版已停产。

另请参阅用于从 FFPE 组织样本中提取高质量 DNA的CELLDATA DNAstorm™ FFPE DNA 提取试剂盒。RNAstorm™ 和 DNAstorm™ 试剂盒可以结合使用，从同一组织切片中获得纯 DNA 和 RNA。请参阅我们的 DNAstorm™/RNAstorm™ 组合试剂盒 (#CD503)，其中包括 RNAstorm™ 试剂盒 (#CD501) 和 DNAstorm™ 试剂盒 (#CD502)。有关详细方案，请参阅我们的应用说明 – 从单个 FFPE 样本中提取双 DNA 和 RNA。我们还提供RNAstorm™ RNA 分离试剂盒，用于从新鲜或冷冻的细胞/组织样本中纯化 RNA。

RNAstorm™ FFPE RNA 分离试剂盒的优势

更高产量的可扩增 RNA

使用 RNAstorm™ 试剂盒原型对 1976 年至 2015 年不同组织的 FFPE 样本进行分析，可以看到 RNA 产量和质量（通过可扩增 RNA 的量来衡量）的显着改善。

通过定量 RT-PCR 从 FFPE 组织中回收 RNA 的比较。“Q”代表具有竞争力的商业 FFPE 提取试剂盒。

更高完整性的 RNA

相对于流行的商业试剂盒，使用 RNAstorm™ 试剂盒提取的 RNA 的 DV200 值增加。DV200 代表长度大于 200 nt 的 RNA 的百分比，使用 Agilent Bioanalyzer RNA 6000 nano 试剂盒测量。

下面显示了使用 RNAstorm™ 试剂盒和试剂盒 Q 所见的相同样品的 RNA 获得的 BioAnalyzer 迹线的示例叠加。

参考

bioRxiv (2020) doi: https://doi.org/10.1101/2020.06.02.130096
Virchows Arch (2020) doi: https://doi.org/10.1007/s00428-020-02838-0
bioRxiv (2020) doi: https://doi.org/10.1101/2020.02.24.963652
摩尔诊断杂志 (2020) 22(4) 555-570。https://doi.org/10.1016/j.jmoldx.2020.01.009
神经外科杂志 (2020) 14, 1-9。doi: 10.3171/2019.12.JNS192155
肺癌 (2020) 139, 1-8。https://doi.org/10.1016/j.lungcan.2019.10.012
口腔肿瘤学 (2020) 100, 104487. https://doi.org/10.1016/j.oraloncology.2019.104487
世界神经外科（2020）。https://doi.org/10.1016/j.wneu.2020.03.112
J Exp Med (2020) 217 (6): e20191787。https://doi.org/10.1084/jem.20191787

产品属性

储存条件：有关存储温度，请参阅单个组件

试剂盒： RNA风暴™ FFPE组织RNA试剂盒，DNAstorm™/RNA风暴™ 组合套件

常见问题

我们的大多数产品在室温下可稳定保存数日，因此产品很可能仍能正常工作。为了安全起见，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前，先进行小规模的阳性对照实验，以确认该产品仍然适用于您的应用。

我们知道的一个例外是 GelGreen™，它比我们大多数其他荧光染料对光照更敏感。如果 GelGreen™ 长时间（数天至数周）暴露在环境光下，其颜色将从深橙色变为砖红色。如果发生这种情况，GelGreen 将不再适用于凝胶染色。

生物科学试剂盒
产品信息表上列出了自收到生物科学试剂盒之日起保证的保质期。一些套件在套件盒标签上印有有效期，这是从产品从我们工厂发货之日算起的保证保质期。套件的功能通常比保证的保质期长得多。如果您希望使用存储中的旧试剂盒，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前进行小规模阳性对照实验以确认该试剂盒仍适用于您的应用。

抗体和其他偶联物
产品信息表上列出了抗体和偶联物自收货之日起的保证保质期。抗体和其他结合物的功能通常比保证的保质期长得多。如果您希望使用存储中的旧偶联物，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前进行小规模阳性对照实验以确认该产品仍适用于您的应用。

对于冻干抗体，我们建议用甘油和抗菌防腐剂（如叠氮化钠）重构抗体以获得最长的保质期（请注意，叠氮化钠与 HRP 偶联物不相容）。

化学品、染料和凝胶染色剂
Biotium 保证化学品、染料和凝胶染色剂在您收到产品之日起至少一年内保持稳定。然而，只要按照建议储存，这些产品中的大多数在多年内都非常稳定。存储条件可在产品信息表或产品安全和数据表、材料安全数据表以及产品标签上找到。荧光化合物应避光以便长期储存。

如果您希望使用已储存超过一年的 Biotium 化合物，我们建议您进行小规模阳性对照实验，以确认该化合物在处理大量样品或珍贵样品之前仍适用于您的应用样品。

基于生产日期的有效期 (DOM)
如果您的机构要求您记录基于试剂生产日期的有效期，请联系 techsupport@biotium.com 寻求帮助。

有特殊稳定性考虑的化工产品：

酯类

酯类化合物包括：
• 琥珀酰亚胺酯（SE，也称为 NHS 酯），例如我们的胺反应性染料
• 乙酰氧基甲基酯（AM 酯），例如我们的膜渗透性离子指示剂染料
• 二乙酸酯改性染料，例如 ViaFluor ™ 405、CFDA 和 CFDA-SE 细胞活力/细胞增殖染料

只要避光和防潮，酯类染料在固体形式下是稳定的。酯在水溶液中不稳定。应在无水 DMSO中制备浓缩储备液（参见 Biotium 目录号90082）。无水 DMSO 中的储备液可在 -20°C 下干燥保存一个月或更长时间。酯类应在使用前立即用水溶液稀释。琥珀酰亚胺酯 (SE) 应溶解在不含会与 SE 官能团反应的含胺化合物（如 Tris、甘氨酸或蛋白质）的溶液中。AM 酯和二乙酸化合物应溶解在不含血清的溶液中，因为血清可能含有会水解该化合物的酯酶。

关于 CF® 染料琥珀酰亚胺酯稳定性的说明

琥珀酰亚胺酯 (SE) 通常容易水解，从而导致标记效率降低。许多用于生命科学研究的市售荧光染料都是高度磺化的染料，这使得它们特别容易吸湿，从而加剧了水解问题。此外，对于几种市售的 SE 活性染料，SE 基团衍生自芳香族羧酸，而 Biotium 的所有 CF® 染料中的 SE 基团均由脂肪族羧酸制备。这种结构差异降低了 CF® Dye SE 反应基团对水解的敏感性，从而产生相对稳定的活性染料，与其他荧光染料的其他 SE 衍生物相比，标记效率始终更高。

马来酰亚胺、MTS 和硫代硫酸盐染料
与琥珀酰亚胺酯染料一样，这些染料也容易水解，尽管水解程度通常要低得多。因此，对于长期储存，建议使用无水 DMSO 制备储备液。

其他活性染料
胺类、氨氧基（也称为甲醛）、酰肼、叠氮化物、炔烃、BCN 和酪胺类活性染料，以及染料游离酸，在-20°C 下储存 6-12 年时通常在水溶液中稳定几个月或更长时间，只要不存在可能与染料的官能团发生反应的化合物。有关特定活性染料的更多信息，请参阅产品信息表。

腔肠素和 D-荧光素

按照建议储存时，腔肠素以固体形式稳定；它们在水溶液中不稳定。应在乙醇或甲醇中制备浓缩腔肠素储备液（通常为 1-100 mg/mL）；不要使用 DMSO 或 DMF 溶解腔肠素，因为这些溶剂会氧化化合物。腔肠素的乙醇或甲醇库存可在 -20°C 或以下储存六个月或更长时间；酒精储备在储存过程中可能会蒸发，因此请使用密封的螺旋盖小瓶并用封口膜包裹小瓶以进行长期储存。丙二醇也可用作溶剂以减少蒸发。如果溶剂蒸发，腔肠素仍会存在于小瓶中，因此在储存前记下小瓶中的体积，以便您可以根据需要调整溶剂体积以校正蒸发。使用前立即在水性缓冲液中制备工作溶液。腔肠素在水溶液中最多可稳定 5 小时。

Aquaphile™ 腔肠素是腔肠素的水溶性制剂。当按照建议储存时，它们以固体形式稳定。Aquaphile™ 腔肠素应在使用前立即溶解在水溶液中。它们在水溶液中最多可稳定 5 小时。

请注意，腔肠素主要是黄色固体，但可能含有深红色或棕色斑点。这不会影响产品稳定性或性能。如果您的腔肠素呈均匀的棕色，则说明它已被氧化，需要更换。

D-荧光素在固体形式下是稳定的，并且在按照建议储存时作为浓缩储备液；它在水溶液中的稀释工作浓度下不稳定。在水中制备浓缩的 D-荧光素储备溶液（通常为 1-100 mg/mL），并在 -20°C 或更低温度下分装储存六个月或更长时间。使用前立即准备工作解决方案。