
Ethidium Monoazide Bromide (EMA)

当未被激活或与 DNA 结合时,单叠氮溴化乙锭 (EMA) 是一种带有光亲和标记的非荧光核酸染色剂。一旦被光激活,染料就会与核酸共价结合并发出荧光。这种染料最常用于标记活细胞和死细胞混合群中的死细胞。
用光激活荧光染料共价标记 DNA
细胞膜不可渗透
在活细胞和死细胞混合群中标记死细胞
与荧光显微镜、荧光酶标仪或流式细胞仪兼容
橙色固体可溶于 DMF 或乙醇
由于 EMA 对活细胞的渗透性相对较低,因此它可以选择性地结合死细胞中的 DNA。光解使死细胞 DNA 共价标记有染料。然后可以清洗并固定细胞制备物,以便通过显微镜、荧光板读数器或流式细胞仪进行分析。该染料已被用于标记 DNA 上的药物结合位点、修饰质粒 DNA 以及标记酵母细胞以进行白细胞吞噬作用测定。这种方法的主要优点是研究人员可以避免对活的病原体进行大量操作。 EMA 已被用于通过 5'-核酸酶 PCR 区分活细菌和死细菌。
活力聚合酶链反应
从琼脂平板转向 v-PCR 是加速细菌活力测试的好方法。在您切换到 v-PCR 方法之前,您需要了解和考虑一些事项。对于活力 PCR 应用,单叠氮化乙锭 (EMA) 的细胞渗透性最强,可能会导致假阴性。Biotium 开发的单叠氮化丙啶 (PMA)是使用最广泛的染料,因此有许多方案和出版物可供参考。PMAxx™ 的设计优于 PMA 和 EMA,并且与现有的 PMA 协议兼容。PMAxx™对活细菌和死细菌有更好的区分,因此它对死细胞标记更具选择性,可用于细菌的 v-PCR 定量。见 PMA & PMAxx™ 参考列表 和 PMA & PMAxx™ 验证细菌菌株。有关 v-PCR 的更多信息,请参阅我们的博客文章。
活力 PCR 试剂盒
要更轻松地开始使用活力 PCR,请了解我们可定制的 活力 PCR 入门套件。您可以选择自己喜欢的活性 PCR 染料,以及是否需要革兰氏阴性菌增强剂。所有入门工具包都随附 EvaGreen® qPCR 预混液和帮助您入门的详细方案。
Biotium 还提供菌株特异性 实时 PCR 细菌活力试剂盒,其中包含针对选定病原体的经过验证的引物:结核分枝杆菌、金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌、大肠杆菌 O157:H7、军团菌和李斯特菌。这些试剂盒提供了您通过实时 v-PCR 选择性检测您最喜欢的活细菌种类所需的一切。
LED光解装置
Biotium 销售两种用于活力 PCR 光解步骤的设备。PMA -Lite™ LED 光解装置专为微量离心管中经过 PMAxx™、PMA 和 EMA 处理的样品而设计。Glo -Plate™ Blue是一款扁平 LED 盒,非常适合微孔板、过滤器或其他格式的样品。
PMA-Lite™ LED 光解装置,用于 PMAxx™、PMA 或 EMA 的光活化
Glo-Plate™ 蓝色LED 照明器,用于 PMAxx™、PMA 和 EMA 的光活化
Biotium 的材料仅供研究使用。
参考
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