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Coelenterazine

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腔肠素及其类似物是异 equorin 和 Renilla 荧光素酶的发光酶底物。
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Coelenterazine 及其类似物是 apoaequorin 和Renilla荧光素酶的发光酶底物。Apoaequorin 用作钙指示剂,而Renilla荧光素酶通常用作转录调节的报告基因。腔肠素与脱辅基水母蛋白结合形成水母蛋白,后者在与钙结合后发光。水母发光蛋白可用于测量从 ~0.1 uM 到 >100 uM 的宽浓度范围的钙。海肾荧光素酶已被广泛用作报告蛋白和生物发光共振能量转移 (BRET) 中的生物发光供体,以研究蛋白质-蛋白质相互作用。腔肠素的其他用途包括化学发光检测细胞或组织中的超氧阴离子和过氧亚硝酸盐。

无法决定使用哪种腔肠素类似物?试试我们的腔肠素取样器套件(目录号 10123)。该试剂盒包括 9 种腔肠素类似物中的每一种 25 ug,包括 native、cp、f、fcp、h、hcp、i、ip 和 n。

腔肠素产品

产品目录编号兆瓦格式
腔肠素取样器套件10123---九种腔肠素类似物各 25 微克:原生、cp、f、fcp、h、hcp、i、ip 和 n
Aquaphile™ 腔肠素(天然)10126423.5黄色固体溶于水或PBS缓冲液
Aquaphile™ 腔肠素 h10127407.5黄色固体溶于水或PBS缓冲液
腔肠素(天然)10110423.5黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素h10111407.5黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素cp10112415.5黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素10113399.5黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素f10114425.5黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素10115457.5黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素ip10116389.5黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素10117417.5黄色固体溶于MeOH
腔肠素i10121533.4黄色固体溶于MeOH或EtOH
腔肠素e10124449.5溶于MeOH和EtOH的深棕色固体
腔肠素 400a (DeepBlueC™)10125391.5灰白色至粉红色固体,溶于乙醇
甲基腔肠素10122331.4黄色固体溶于MeOH和EtOH

已经合成了十几种腔肠素类似物,其中许多现在可以从 Biotium 买到。这些腔肠素类似物在发射波长、细胞膜渗透性和量子效率方面具有不同的特性。表 1 和表 2 分别总结了具有海肾荧光素酶和载脂蛋白的腔肠素衍生物的发光特性

Biotium 提供腔肠素 400a(也称为 DeepBlue C™)(目录号 10124),它作为海肾荧光素酶 (Rluc)的底物并产生以 400 nm 为中心的发射峰。它是 BRET 研究的首选海肾荧光素酶底物,因为它对 GFP 受体的发射干扰最小。

此外,请参阅我们的水溶性 Aquaphile™ 腔肠素,以天然腔肠素(目录号 10126)或腔肠素 h 类似物(目录号 10127)出售。这些制剂容易溶解在水或缓冲液中供体内使用。

最后,Biotium 提供甲基腔肠素(coelenterazine,2-甲基类似物)(目录号 10122),据报道,它是细胞对抗活性氧 (ROS)(如单线态氧和超氧阴离子)的卓越抗氧化剂。腔肠素衍生物具有膜渗透性、无毒且对 ROS 具有高反应性。有关腔肠素类似物的比较,请参阅支持文件下的腔肠素传单。

表 1. 腔肠素类似物与海肾荧光素酶的发光特性*

模拟发射最大值 (nm)总光 (%)初始强度
腔肠素(天然)47510045
腔肠素h47541135
腔肠素cp47023135
腔肠素f4732845
腔肠素47547900
腔肠素e418、475137900
腔肠素 400a (DeepBlueC)400------

*来自生化的数据。生物物理学。水库。公社。233,349 (1997)。

表 2. Coelenterazine 类似物与 Apoaequorin 的发光特性*

模拟发射最大值 (nm)相对发光容量相对强度半上升时间 (s)
腔肠素(天然)4651001.000.4-0.8
腔肠素h4750.82100.4-0.8
腔肠素cp4420.95150.15-0.3
腔肠素4440.671900.15-0.3
腔肠素f4730.80180.4-0.8
腔肠素4670.260.015个
腔肠素ip4410.54471个
腔肠素4520.571350.4-0.8
腔肠素i4760.700.038个
腔肠素e405、4650.504个0.15-0.3

*来自生化的数据。J. 261, 913 (1989)

参考

1)冰毒。细胞生物学。40, 305(1994)。
2)冰毒。酵素。172, 164(1989)。
3) J. 细胞生物学。115, 1259(1991)。
4) 细胞钙, 14, 373(1993).
5)过程。国家队。学院。科学。美国 96, 151(1999)。
6)过程。国家队。科学。美国 97, (7), 3684 (2000)。
7) 自由基。生物学。医学。28, 1232(2000)。
8)循环。水库。84, 1203(1999)。
9)免疫学。今天 15, 7(1994)。
10)肛门。生化。206, 273(1992)。
11) 生物化学。生物物理学。水库。公社。233, 349(1997)。
12) 分子成像, 3 (1), 43(2004)。
13) 生物化学。药效学。60, 471(2000)。
14) 生物化学。J. 261, 913(1989)。
15) 细胞钙, 12, 635(1991)。


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