CellBrite® Steady Membrane Staining Kits
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CellBrite®Steady Membrane Staining Kits 允许在培养过程中对细胞表面进行长达数天的荧光成像。CellBrite®Steady Dyes 是独特的荧光膜探针，可在细胞表面和细胞内区室之间分布，因此细胞能长时间保持细胞表面染色。配合使用 CellBrite®Steady Enhancer，可减少或消除细胞内染色，从而实现细胞轮廓或边界的成像。
Retained on cell surface, unlike other membrane dyes that are rapidly internalized
Image live cell surface membranes for 24 hours or longer
Image in your preferred channel with 9 color options from blue to near-IR
Optional Enhancer masks intracellular signal for selective imaging of cell surface
Rapid, even staining in complete cell culture medium
Dye colors from blue to near-IR, with STORM-compatible options
与其他在标记后会通过胞吞作用迅速从细胞表面丢失的膜/细胞表面染色剂不同，CellBrite®Steady Dyes 在细胞内细胞器与质膜之间达到平衡。在培养过程中，细胞在数小时至数天内除了保留胞内染色外，还能保持表面染色。CellBrite®Steady Enhancer 是试剂盒中包含的可选试剂，可用于掩盖 CellBrite®Steady Dyes 的胞内荧光，从而更选择性地观察细胞边界。
Kit Components
Kit sizes are based on 200 uL labeling volume, actual number of labelings may vary based on culture chamber size/staining volume.
Trial size kit (100 labelings):
CellBrite Steady Dye, 1000X in DMSO, 20 uL
CellBrite Steady Enhancer, 1000X in DMSO, 20 uL
Full size kit (500 labelings):
CellBrite Steady Dye, 1000X in DMSO, 100 uL
CellBrite® Steady Enhancer, 1000X in DMSO, 100 uL
稳健且一致的长期成像：CellBrite®稳定在信号稳定性方面优于其他膜染料
CellBrite®Steady染色比CellMask™ Green更适合实时活细胞成像。活MCF7细胞使用1X CellBrite™ Steady 488进行染色，并使用CellBrite®在37°C的完整培养基中加入Steady增强剂，无需洗涤步骤。细胞染色后培养72小时，并在所示时间点进行成像。对于CellMask™ Green染色，细胞按照制造商的建议进行染色。将染料稀释至1:1000的HBSS缓冲液中，在37°C下染色10分钟，然后用缓冲液冲洗，最后加入新鲜培养基。细胞培养72小时后，在所示时间点进行成像。
用亲脂性碳菁染料Neuro-DiO、DiI、DiD或CellBrite染色的活HeLa细胞®稳定膜染料与增强剂。亲脂性碳菁染料会迅速内化到细胞内区室，因此表面染色必须在短时间内进行成像。CellBrite®稳定染料能均匀地染色细胞膜，使用增强剂后，表面染色可清晰成像长达24小时。
在您首选的通道中成像，提供从蓝色到近红外的9种颜色选项
使用CellBrite染色的活MCF7细胞®染色30分钟后，无需洗涤步骤，直接通过共聚焦显微镜进行成像。
选择 CellBrite®稳定染料
CellBrite®Steady Dyes 提供从蓝色到近红外的多种颜色。CellBrite®Steady 550、650 和 685 荧光团与 STORM 超分辨率成像兼容。CellBrite 对胞内荧光的遮蔽®Steady Enhancer 往往能对远红外 CellBrite®Steady 650 和 CellBrite®Steady 685 染料。
成功小贴士
染色后洗涤对于共聚焦显微镜成像是非必需的，但对于落射荧光显微镜成像则是必需的。对于在可见光范围内（405、488和550）有荧光的染料，如果不进行洗涤，通过显微镜目镜可能可以看到也可能看不到染色，因此在进行无洗涤共聚焦成像时，您可能需要使用明场或其他标记物来初步聚焦细胞。
CellBrite®Steady Dyes 具有低毒性，可连续孵育于细胞培养基中。Enhancer 可能对某些细胞类型具有毒性，尤其是在较高浓度下。Enhancer 可与膜染料共同孵育，或在染色后添加，以最大限度减少 Enhancer 对细胞的潜在影响。详情请参阅产品操作指南。
为您的应用选择合适的染色剂
CellBrite®必须使用Steady Dyes来染色活细胞。它们不能用于染色已固定的细胞（这些染料主要标记固定细胞内的细胞膜）。我们的原始CellBrite®细胞质膜染料可用于固定后的细胞染色。如需为您的应用寻找合适的染料，请参阅我们的膜与细胞表面染色对比，或下载我们的膜与表面污渍手册.
使用 CellBrite 进行膜染色®Steady Dyes 在甲醛固定后能立即保留，但不耐甲醇或去污剂。如果细胞在甲醛固定后储存，随着时间的推移，染料会重新分布并染色细胞质结构。Enhancer 不耐固定；如果经 Enhancer 处理的细胞在染色后被固定，掩蔽效果会消失，胞内荧光会恢复。对于可固定且耐受免疫荧光染色透化处理的细胞表面染色，我们推荐我们的CellBrite®固定膜染色剂或MemBrite®固定细胞表面染色试剂盒.
CellBrite®稳态染料易于在细胞间转移，不建议用于细胞追踪、共培养或移植研究。我们的稳定、无毒ViaFluor®SE 细胞增殖试剂盒可用于共价标记细胞，以便通过显微镜或流式细胞术进行长期追踪。请参阅我们的技术提示：使用 ViaFluor®SE染色用于细胞追踪和共培养了解更多。
CellBrite®Steady Dyes 已验证可用于纯化细胞外囊泡（EVs）和外泌体的标记。然而，我们的测试表明 CellBrite®Steady 会非特异性地结合到珠子结合的外泌体上。为了实现对纯化和珠子结合外泌体的最佳标记，我们推荐使用我们的ExoBrite™ True EV 膜染色剂。了解更多关于我们的 ExoBrite™ 染色剂和已验证抗体的信息，用于外泌体与细胞外囊泡标记.
CellBrite® Steady Membrane Staining Kits
| Product | Ex/Em | Laser Line(s) (nm) | Detection Channel | Size | Catalog Number |
|---|---|---|---|---|---|
| CellBrite® Steady 405 Membrane Staining Kit | 406/428 nm | 405 | DAPI | 100 Labelings | 30105-T |
| 500 Labelings | 30105 | ||||
| CellBrite® Steady 488 Membrane Staining Kit | 505/529 nm | 488 | FITC | 100 Labelings | 30106-T |
| 500 Labelings | 30106 | ||||
| CellBrite® Steady 550 Membrane Staining Kit | 562/579 nm | 555 or 561 | TRITC or Rhodamine | 100 Labelings | 30107-T |
| 500 Labelings | 30107 | ||||
| CellBrite® Steady 568 Membrane Staining Kit | 569/588 nm | 555 or 561 | Alexa Fluor® 568 | 100 Labelings | 30150-T |
| 500 Labelings | 30150 | ||||
| CellBrite® Steady 594 Membrane Staining Kit | 580/615 nm | 555, 561, or 594 | Texas Red® | 100 Labelings | 30142-T |
| 500 Labelings | 30142 | ||||
| CellBrite® Steady 650 Membrane Staining Kit | 656/676 nm | 640 | Alexa Fluor® 647 | 100 Labelings | 30108-T |
| 500 Labelings | 30108 | ||||
| CellBrite® Steady 685 Membrane Staining Kit | 686/708 nm | 685 | Alexa Fluor® 680 | 100 Labelings | 30109-T |
| 500 Labelings | 30109 | ||||
| CellBrite® Steady 750 Membrane Staining Kit | 755/789 nm | 730 | Alexa Fluor® 750 | 100 Labelings | 30141-T |
| 500 Labelings | 30141 | ||||
| CellBrite® Steady 785 Membrane Staining Kit | 788/815 m | 785 | Alexa Fluor® 790 | 100 Labelings | 30152-T |
| 500 Labelings | 30152 |
我们的大多数产品在室温下可稳定保存数日，因此产品很可能仍能正常工作。为了安全起见，我们建议在处理大量样品或珍贵样品之前，先进行小规模的阳性对照实验，以确认该产品仍然适用于您的应用。
我们知道的一个例外是 GelGreen™，它比我们大多数其他荧光染料对光照更敏感。如果 GelGreen™ 长时间（数天至数周）暴露在环境光下，其颜色将从深橙色变为砖红色。如果发生这种情况，GelGreen 将不再适用于凝胶染色。