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对于任何想要对外泌体膜进行染色的人,我们的第一个建议是 ExoBrite™ EV 膜染色剂。ExoBrite™ EV 膜染色剂的优点是:
专为外泌体染色而设计和配制
非常低的背景,出色的信噪比
轻松与抗体结合进行共染(不像 CellBrite® Fix 或 MemBrite® Fix 等活性染料)
能够与珠结合的外泌体一起使用(与大多数其他膜或活性染料不同)
然而,我们发现其他一些膜和细胞表面染色剂也能够染色外泌体。其他染料均不具有与 ExoBrite™ EV 膜染料相同的低背景和高信噪比,但它们可能具有某些测定所需的其他特性(例如可固定性)。
用于通过流式细胞术检测 EV 的膜染料
膜染料 | 通过以下流程验证: | 染色水平 | 笔记 |
---|---|---|---|
CellBrite® 稳定 | • 富含 PEG 的 HeLa 衍生 EV • SEC 纯化的 MCF-7 衍生外泌体1 | 强染色 | • 荧光膜探针 • 所有 5 种颜色都经过验证可用于外泌体检测 • 非共价标记 • 染料与磁珠非特异性结合 |
MemBrite® Fix 405/430 | • 富含 PEG 的 HeLa 衍生 EV • SEC 纯化的 MCF-7 衍生外泌体1 | 强染色 | • 用于太平洋蓝通道的荧光膜探针 • 用于共价标记的活性染料 • 可能不适用于抗体共染色 |
CellBrite® Fix 488 和 555 | • SEC 纯化的 MCF-7 衍生外泌体1 | 中度染色 | • 用于 FITC 和 PE/Cy3 通道的荧光膜探针 • 用于共价标记的活性染料 • 可能不适用于抗体共染色 • 在出版物中用作外泌体染色2 |
Di-8-ANEPPS | • SEC 纯化的 MCF-7 衍生外泌体1 | 中度染色 | • 红色荧光膜探针 • 非共价标记 • 比其他染料溶解度低 • 在出版物中用作外泌体染色剂3 , 4 |
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1使用 qEV 大小排阻柱 (SEC) (IZON) 制备 SEC 纯化的 MCF-7 细胞来源的外泌体
2 Cell Host & Microbe (2018) Aug 8;24(2):208-220.e8 doi: 10.1016/j。 chom.2018.07.006
3 Cytometry A. (2016) Feb;89(2):196-206 doi: 10.1002/cyto.a.22787
4肛门。化学。(2021) 93, 14, 5897–5905 doi.org/10.1021/acs.analchem.1c00253
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